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                当前位置 〉 信息文章 〉技术支持 〉BEX CUY 21 EDIT II的“杀手锏”使基因转染效率达到前所未有的高度

                  说到转染,大家最先会想到的恐怕▆就是脂质体转染。诚然,像293、Hela等细胞系,脂质体转染也№能达到70-80%。而,对于其他一些极娇贵的细胞,如原代神经元,原代神经╱干细胞等来说,脂质体转染不仅转化效率很低(最高10%),而且细№胞死亡率极高。那么这种情况下,研究人员就会转而投向更加昂贵而且毒性更※大的病毒包裹方法上去。经过反复的摸索,最终将转化效率提高︾了,但是,细胞在后续培养中,死亡率很高,细胞自然的生理生化特性遭到破坏,无法后续实验。这时,电穿孔方法就是那最后一根救命稻草。
                  上个世纪80年代世界第一台电转化仪诞生。它的波形就是单向高压方波的重复轰击。在这⊙种条件下,细胞□死亡率极高。如小鼠精原干细胞这种脆弱的细胞就会全部死亡。


                   
                  所以,有些系统就整合了这两部分功能,配备特殊试剂的电转化仪应运而生。它延续了传统的【方波,并设定了固定的参数。的确,这种模式的诞生,较之前一种模式↓提高了转化效率,降低了死亡率。但也就是这一功能,被普遍认为是“黑匣子”,因为客户只能知道他的①细胞转染用的是几号程序,具体参数是怎样的,不知道!更无法优化设定参数!而且,为了提高转化■效率,每换一种或几种细胞,就必须重新购买不同的转染试剂,这点也是多数客户难≡以接受的“霸王条款”。而离开这些特殊的转染试剂,这个仪器基本是被实验室闲置了。
                  那么,无需特殊转染试剂辅助,又能显著提高转化效率◥的电转化仪的研发就成为♀细胞转染的发展方向。
                  1990年,BEX公司诞生。并成为日本唯一专业研发,生产电转化仪和细胞融合仪的厂家。他公司生产的CUY21一经推出,即得到广泛好评,已有超过2000台的CUY21全系列转化仪服务于全球科研工作者,并持续20多年依然在该领域保持无法逾越的高度。
                  2012年10月,回顾经典,BEX再次发布具有历程碑意义的超∩级多脉冲活体/细胞电转化仪CUY21 EDIT II。该电转化仪无需特殊试剂即可得到极高的转染效率,尤其是极难转的细胞系,如原代神经元的转染,可以达到50-60%。这一突破解决了长久以来原代细胞转染存活率低、转化∞效率低下,价格ω 昂贵的问题。因此,许多受益的学者很想了解到底是什么,彻底改▃变了他们对电转化仪的认识。
                  归根结底,就是CUY21 EDIT II的“杀手锏”正反动态衰减方波脉冲◆模式。


                   
                  大家都知道,衰减指数波脉冲比方波脉冲具々有更好的转化效率,衰减指数波脉冲可以转化具有坚硬外壁的细菌和酵母,但由于波形尖锐,如果转染动物细胞,容易∑ 引起细胞死亡;方波脉冲转化效率比指数波低,但波形柔和,适合转染动物细胞,具有高存活效率,但转化效率比①较低。BEX能够∩把这两种波形技术融为一体,就是上面的动态衰减方波。我们这一年半的◢时间,用CUY21 EDIT II 转化过的细胞超过百种,其中多数都↑是极难转染的细胞,包括大鼠胚胎原代神ζ经元细胞、NIH/3T3、NG108-15、raw264.7、SSC、HepG-2、N2a、PC3、LCL、NIT1、小鼠胚胎原代干细胞以及细胞系,和原代小鼠β胰岛♂细胞团、人B细胞系、人淋巴细胞等等,达到的转染效率我们十分欣喜∏。
                  BEX CUY21 EDIT II 也涵盖了其他波形。如静态衰减脉冲,恒流脉冲。这两种波形被指定为活体转染脉↙冲模式,原因就是方波的波形柔和,而且对活体电转来说存活率就显得非常重要。特别是独有的恒流脉冲,使得CUY21 EDITII 成为世界上唯一一台可「以成功转染成年鼠脑的电转化仪。倘若用这种模式㊣ 转染细胞,转染效率就比动态衰减脉冲要低些。
                  我有作●过对比试验,分别用动╲态衰减脉冲模式,静态衰减脉冲模式和脂质体转染方法平行∞对小鼠胰岛瘤β细胞系进行转染。结果很明显:
                   
                  综上所述,BEX CUY21 EDIT II 动态衰减脉冲模式最大程度的提高了转染效率◆,同时保证了细胞的存活率,为极难转染细胞的研究开辟了新的一页。

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